Mi?rcoles, 12 de enero de 2011

INTRODUCCI?N

El estudio de las manchas de semen tiene gran importancia en la criminal?stica, pues al igual que la sangre, constituye una prueba muy precisa. Debido a su procedencia, su estudio generalmente se encuentra asociado a delitos que afectan las buenas costumbres y el buen orden de las familias, por ejemplo; casos de violaci?n, actos lascivos, acto carnal con menores y el ultraje al pudor, entre otros. En todos los casos, el informe pericial que emite el experto adquiere fundamental importancia para la investigaci?n, esclarecimiento del hecho y calificaci?n legal.

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?Qu? es el semen?

El semen o esperma es un l?quido viscoso, ligeramente alcalino, blanquecino a amarillento, de olor sui generis, que es expulsado a trav?s del pene en la eyaculaci?n. El semen est? constituido por una suspensi?n de espermatozoides en el plasma seminal, y se forma por el aporte de los test?culos, el epid?dimo, la ves?cula seminal, la pr?stata, las gl?ndulas de Cowper, las gl?ndulas de Litre y los vasos deferentes.

Los espermatozoides1 son c?lulas haploides que constituyen el gameto masculino de los animales, su funci?n es la formaci?n de un cigoto al fusionarse su n?cleo con el del gameto femenino (ovulo). La funci?n del plasma seminal es aportar un medio nutritivo con osmolalidad y volumen apropiado para el transporte y sobrevivencia de los espermatozoides en el aparato genital femenino. Menos del 10% del volumen total del semen corresponde a los espermatozoides, el otro 90% al l?quido seminal.

Durante la eyaculaci?n podemos distinguir varias fracciones del volumen total del semen con diferente composici?n qu?mica:

1) La Fracci?n Pre-eyaculatoria (10% al 15% del volumen total): Procede de las secreciones de las gl?ndulas de Cowper y Litr?. Este l?quido se descarga por la uretra por est?mulo er?tico, es de consistencia mucosa, transparente y no presenta espermatozoides. Este hecho es de gran relevancia pericial, ya que es posible al examinar una mancha de naturaleza seminal, no hallar espermatozoides3. La funci?n de esta fracci?n es hacer m?s resbaladizo el canal de la uretra (lubricante).
2) La Fracci?n Previa o prost?tica (13% al 33% del volumen total): Proviene de la pr?stata, es fluida, no presenta espermatozoides. Tiene una elevada concentraci?n de fosfatasa ?cida y ?cido c?trico.

3) La Fracci?n Principal (5% al 10% del volumen total): Procede del epid?dimo y de los conductos deferentes, presenta elementos l?quidos y gelatinosos. Es la fracci?n que contiene la mayor cantidad de espermatozoides.

4) Fracci?n Terminal (50% al 60% del volumen total): Procedente de las ves?culas seminales. Es de consistencia gelatinosa o coloide y contiene una considerable cantidad de fructosa.


En general, las secreciones de los ?rganos accesorios protegen el tracto urinario de agresiones de pat?genos, intercept?ndolos o bloque?ndolos. El mecanismo de lavado de la uretra por estas secreciones, establece un medio hostil a los pat?genos5. El semen tambi?n puede contener algunas c?lulas desprendidas del epitelio de los conductos excretores y de la uretra.

En caso de infecciones, el semen puede llegar a contener altas concentraciones de virus o g?rmenes, por ejemplo, el Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH), que provoca el SIDA ? el Virus de la hepatitis B (VHB), por lo tanto, el t?cnico y el analista de laboratorio que trabajan con evidencias de tipo biol?gico deben extremar las medidas de bioseguridad durante su manipulaci?n. Las normas de bioseguridad indican al manipulador de la evidencia c?mo hacer para cometer menos errores y no sufrir accidentes y, si ellos ocurren, c?mo minimizar sus consecuencias, estas normas son pr?cticas, f?ciles de entender y aplicar.

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Se recomienda revisar el ?Manual de Capacitaci?n de Analistas de ADN y el de Capacitaci?n de Laboratorios Forenses?, de la Iniciativa ?President?s DNA , la gu?a de ?Recomendaciones para la recogida y envi? de muestras con fines de identificaci?n gen?tica?, del grupo Espa?ol y Portugu?s de la ISFG , y la ?Gu?a de Capacitaci?n y Directrices-Evidencias Biol?gicas?, del Grupo de Trabajo Cient?fico en T?cnicas y An?lisis de ADN (SWGDAM) , para adquirir informaci?n sobre los protocolos, directrices, seguridad y riesgo en el manejo de evidencias biol?gicas y reactivos qu?micos que se utilizan en un laboratorio de tipo biol?gico y de biotecnolog?a.

Ubicaci?n de las Manchas de Semen:

Las primeras pruebas utilizadas en el an?lisis de manchas de semen fueron organol?pticas y algunas reacciones qu?micas, sin embargo, estas pruebas daban resultados similares en sustancias como el moco y la grasa cruda de origen animal, cuyas apariencias sobre tela son similares a la del semen.


En 1826, Olliver d?Angers y Barruel informaron sobre un caso de agresi?n sexual donde se sospechaba que ciertas manchas en la ropa de la victima fueron hechas intencionalmente con grasa de origen animal. Los expertos analizaron las ropas con respecto a su solubilidad en agua, naturaleza, color y conducta en alcohol absoluto. Ambos concluyeron que la mancha era de semen. En aquella ?poca los investigadores se guiaban solo por estos par?metros.

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Hoy d?a es bien sabido que las manchas de semen presentan algunas caracter?sticas en raz?n al soporte donde se asientan. Sobre tejido absorbente (s?banas, ropas, etc.), exhiben un color blanco-amarillento, la forma de sus bordes es irregular, similar a los mapas topogr?ficos. Estas manchas producen efecto de ?apergaminamiento? y ?almidonamiento? del soporte. Sobre superficies no absorbentes rugosas (cer?mica), el semen formar? costras o escamas m?s o menos grandes de color blanquecino transparente. Sobre superficies lisas (pisos pulidos) el semen se extiende formando una mancha grande, delgada y casi transparente, poco visible en superficies oscuras.


La fluorescencia es la propiedad de una sustancia para emitir luz cuando es expuesta a radiaciones de tipo UV, rayos cat?dicos o rayos X. Las radiaciones absorbidas (invisibles al ojo humano), son transformadas en luz visible. La luz puede ser apreciada mientras la superficie es irradiada con la fuente de luz. El espectro de excitaci?n de las muestras de semen tiene longitudes de onda que van de 350 nm (Luz UV) a 500 nm (Luz Azul-verde) .

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A. R. Calloway aconseja examinar las manchas sospechosas de ser semen por su fluorescencia y fosforescencia 3,5. La Fosforescencia es el fen?meno en el cual ciertas sustancias tienen la propiedad de absorber energ?a y almacenarla, para emitirla posteriormente en forma de luz. El mecanismo f?sico que rige este comportamiento es el mismo de la fluorescencia, no obstante la principal diferencia con ?sta, es que hay un retraso temporal entre la absorci?n y la re-emisi?n de los fotones de energ?a.

Calloway recomienda la siguiente secuencia de observaci?n con luz UV5:
1. Examen directo con luz UV (365 nm) a temperatura ambiente: en general se observan las manchas de semen por la fluorescencia caracter?stica, excepto cuando el tejido presenta tratamiento de blanqueado ?ptico.


2. Examen directo con luz UV (365 nm) previa refrigeraci?n, ? el material puede ser colocado sobre hielo seco, cuya temperatura de volatilizaci?n es de -78,5 ?C: La fosforescencia de las manchas persiste 20 segundos despu?s de retirada la fuente de luz UV.

Otros fluidos del cuerpo producen fosforescencia a baja temperatura, por lo que la t?cnica de Calloway es de orientaci?n y no de certeza. Calloway y cols. han detectado fosforescencia en manchas de sudor, no as? en saliva ni sangre . La fluorescencia y fosforescencia del semen est? relacionada con la presencia de los amino?cidos tirosina y tript?fano, una base nitrogenada llamada flavina y algunas veces por la presencia de la bacteria Pseudomona fluorenscens. El semen tambi?n contiene peque?as cantidades de una mol?cula fluorescente llamada colina.


L?mpara de Bretton ? Luz Azul:

La L?mpara Bretton, luz azul, o luz forense, tiene un principio y uso similar a la l?mpara de Wood, pero toma en cuenta la fluorescencia de fondo, por lo que el observador debe usar gafas con un filtro especial para eliminar la luz de fondo y dejar pasar la luz fluorescente proveniente s?lo de la mancha de semen . La capacidad de bloqueo de los filtros es directamente proporcional a la sensibilidad del sistema para detectar cantidades muy peque?as de semen.

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En la t?cnica de Bretton hay dos sistemas ?pticos a considerar; la fuente de excitaci?n (Luz Azul) y el filtro barrera de luz (Lentes Naranja). La mancha de semen al ser irradiada con la fuente de luz azul absorber? parte de la misma y emitir? en el espectro de luz amarillo-naranja-rojo, y con la ayuda del filtro (lentes naranja), se observaran las manchas fluorescentes color naranja. Hay que tomar en cuenta la fluorescencia de algunas cremas o aceites, as? como la de algunos colores claros y/o satinados.

Poliligth PL500sc:

Poliligth PL500sc es una fuente de luz port?til de alta intensidad, que produce diferentes longitudes de ondas graduales, que oscilan entre 310 y 650 nm. Tiene aplicaci?n en la detecci?n de huellas dactilares latentes, saliva, sangre y semen . En este sistema tambi?n se utilizan sistemas de filtro para la visualizaci?n de las manchas y su principio es el mismo que el de la l?mpara de Bretton18, descrito con anterioridad.

Ensayos cristalogr?ficos:

El primer art?culo sobre estos ensayos apareci? en 1896, y estas pruebas se siguen utilizando hoy d?a en algunos laboratorios, consisten en la aplicaci?n de reactivos que inducen la formaci?n de cristales que pueden luego ser observados bajo el microscopio.

Ensayos de Florence y Barberio:

En 1895 y 1896, el Dr. Florence en Lyon public? una serie de documentos refiriendo sus estudios en fluidos seminales y su aplicaci?n m?dico-legal. Para esta ?poca, el ahora familiar test de Florence fue introducido y considerado como presuntivo, el cual puede ser practicado antes de iniciar una b?squeda cuidadosa de c?lulas esperm?ticas u otro elemento en manchas sospechosas de semen. Este ensayo se basa en la formaci?n de cristales de yoduro de colina a partir Iodo y la colina presente en el semen.

La colina es una base org?nica presente en todas las c?lulas que interviene en el transporte de l?pidos y en su metabolismo al formar los fosfol?pidos. La Colina proveniente de la ves?cula seminal se origina a partir de la escisi?n del grupo fosfato de la fosforil-colina por la acci?n de la enzima fosfatasa.


Hektoen y McNally en 1923, consideraron que un test de Florence positivo pod?a entra?ar una posibilidad, pero un test negativo indicaba la ausencia de semen inequ?vocamente. Sin embargo, se conoce que la positividad de la reacci?n depende de la presencia de colina libre en el fluido seminal. Kind S. realiz? algunos experimentos donde no observaba resultados con este test, notando que al disolver la muestra en agua destilada e incubar a 37? C por 30 min. obten?a resultados positivos, este comportamiento se debe a que en la mancha seca se detiene la actividad hidrol?tica de la fosfatasa, por lo tanto, no se puede tener la colina en su forma libre, sino como fosforil colina.

Kahane y colaboradores en 1937, llevaron a efecto un n?mero de estudios sobre la bioqu?mica, metabolismo y distribuci?n tisular de colina, ambos cient?ficos se?alan que el semen humano contiene entre 11.2 y 14.4 mg de colina/100 ml de semen, tambi?n se?alan que cualquier tejido o material biol?gico, como p. e., la sangre, con altas concentraciones de colina, dar?a positivo en el test.

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Los cristales caracter?sticos de Florence no se forman a partir de moco nasal o vaginal, orina, sudor, saliva, l?grimas, leche materna, ni algunas muestras de semen de animales.

En esta reacci?n el Iodo se une a la colina form?ndose un cristal en forma de aguja de reloj, color ?mbar, denominado yoduro de colina.

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En 1905, Barberio public? un test cristalogr?fico para fluido seminal, el test de Barberio, que empleaba una soluci?n saturada de ?cido p?crico . Se dice que esta reacci?n es muy sensible, y pod?an obtenerse resultados positivos con semen, manchas seminales y material seminal parcialmente descompuesto. El moco vaginal, moco nasal y saliva no dan positivo para la reacci?n. Barberio pens? que la sustancia en el semen responsable para la reacci?n era org?nica y diferente de la sustancia reactiva en el test de Florence, esta sustancia se hallaba presente en plasma seminal e incluso en muestras de azoosp?rmicos, Bokarius en 1907 uso ?cido p?crico disuelto en ?cido ac?tico glacial. En 1913 Baecchi sugiri? que los cristales vistos por Barberio pod?an ser de picrato de espermina. Rosenhein en 1924 mencion? tambi?n, que los cristales de Barberio eran de picrato de espermina.

El semen contiene una elevada proporci?n de sustancias fosforadas, entre las que se encuentran el di-fosfato de espermina. La espermina se produce en la pr?stata y los test?culos. Esta base se ha encontrado tambi?n en otros ?rganos ajenos al aparato genital masculino, desconoci?ndose su significancia biol?gica. Conjuntamente tambi?n existe en el semen otra base, la espermidina, que puede considerarse el producto de la hidr?lisis parcial de la espermina, el olor sui generis del semen se debe principalmente a esta base.

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Tinci?n de c?lulas esperm?ticas:

Los espermatozoides fueron vistos por primera vez en 1677 por el holand?s, estudiante de medicina Johan Hamm , que los denomin? ?animaculae?. Hamm relat? esta observaci?n a Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723), que un par de a?os m?s tarde realiz? la primera descripci?n de los espermatozoides humanos, consider?ndolos como un componente normal del semen de cualquier animal.

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Los espermatozoides son las c?lulas reproductoras masculinas , cada uno consiste de un n?cleo, una pieza media y una cola. En los seres humanos, el n?cleo tiene aproximadamente 4,5 micras de largo y 2,5 micras de ancho, en ?l, se conserva el ADN enrolladlo en unas estructuras llamadas protaminas. La cola tiene aproximadamente 40 micras de largo y su funci?n es hacer que el espermatozoide se desplace.

Un tipo muy singular de n?cleo celular, es el de los espermatozoides de los mam?feros. En ellos el ADN no se une a las histonas, sino a otras prote?nas llamadas protaminas. Las protaminas son m?s peque?as que las histonas y m?s b?sicas, con lo que la atracci?n entre ellas y el ADN es m?s fuerte y el empaquetamiento mayor, esto favorece la movilidad del espermatozoide. Esta uni?n del ADN a las protaminas se llama estructura cristalina. Las protaminas inducen arreglos lineales ondulantes lado a lado y no enrollamiento como las histonas .

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Los espermatozoides de muchas especies de mam?feros son similares en tama?o y forma. Los perros tienen espermatozoides muy parecidos a los del humano, pero tienen aproximadamente un tercio de su tama?o.

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La visualizaci?n de un espermatozoide en una mancha, es prueba de que la misma est? constituida, total o parcialmente por semen. Tal reconocimiento es f?cil en manchas de semen de reciente data, pero se complica al transcurrir el tiempo29.

Si los espermatozoides han perdido la cola, puede ser dif?cil reconocerlos con la ayuda del microscopio, sobretodo en muestras contaminadas con bacterias y/u hongos. Si el sujeto donante es aspermico o azospermico, la identificaci?n de la mancha se complica a?n m?s.

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Pollack en 1948 estableci? una distinci?n entre "aspermia" y "azoospermia". La primera condici?n se caracteriza por una ausencia total de espermatozoides en la eyaculaci?n. La eyaculaci?n de una persona que sufre de aspermia, seg?n Pollack, no se debe llamar semen. El t?rmino "azoosp?rmico" se refiere a cualquier muestra seminal en el que los espermatozoides maduros no est?n presentes.

En la vasectom?a se rompen ? ligan los conductos que transportan el semen hasta el pene, as?, los hombres vasectomizados no tendr?n en el fluido seminal espermatozoides, s?lo los componentes del plasma seminal

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En la tinci?n de c?lulas esperm?ticas ocurren una combinaci?n de fen?menos f?sicos y qu?micos: la absorci?n, capilaridad y ?smosis participan en cierto grado. El fundamento de la prueba se basa en la afinidad de los colorantes b?sicos por los elementos celulares ?cidos y de los colorantes ?cidos por elementos celulares b?sicos.

La tinci?n m?s conocida en los laboratorios de criminal?stica a nivel mundial es la denominada ??rbol de Navidad7?. Usando el microscopio compuesto, los cient?ficos buscan c?lulas esperm?ticas en l?minas portaobjetos preparadas a partir de macerados de hisopos, ropa, etc. Las l?minas se colorean con la tinci?n de Kernechtrot-Picro-indigo-carmin, o "?rbol de navidad", donde los n?cleos de los espermatozoides se colorean de rojo carm?n brillante y las colas de color verde-azulado. Para obtener el protocolo consulte la siguiente bibliograf?a: ?Laboratory Training Manual, President?s DNA Initiative?, Protocolo 2.04, para la Identificaci?n de c?lulas esperm?ticas.


La tinci?n de ?rbol de Navidad provee excelentes detalles morfol?gicos y una buena discriminaci?n entre los espermatozoides y las c?lulas epiteliales. Esto es importante en muestras contaminadas o mezcladas.

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La tinci?n histol?gica tradicional de hematoxilina y eosina (H & E) tambi?n es ampliamente utilizada en los laboratorios de criminal?stica, as? como la tinci?n Giemsa, Diff Quick y Ziehl Neelsen Loefler.

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Testsimplets :El test consiste en un portaobjetos dotado de una capa de colorantes liofilizados que al ponerse en contacto con la muestra h?meda ti?en las c?lulas presentes en ella. Esta capa liofilizada consta de dos colorantes: acetato de violeta de cresilo y nuevo azul de metileno. La afinidad espec?fica de las estructuras celulares por los colorantes ocasiona tinciones que permiten proceder a una clasificaci?n de las c?lulas. La intensidad del color y la proporci?n de mezclado de los colorantes en el recubrimiento del portaobjetos son constantes y est?n estandarizados, con lo cual se obtienen tinciones fiables.

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Detecci?n del n?cleo del espermatozoide humano por inmunofluorescencia (Ensayo Sperm Hy Liter):

El kit SPERM HY-LITER? contiene un pool de 448 anticuerpos monoclonales extra?dos del rat?n y derivados del semen humano que realizan el marcaje del n?cleo del espermatozoide, este complejo ant?geno-anticuerpo es detectado luego con la ayuda de un microscopio de fluorescencia.



El ensayo de SPERM HY-LITER? es sensible, fiable y f?cil de usar. La prueba puede detectar un solo n?cleo de espermatozoide humano entre una mezcla de c?lulas y semen de otras especies. Este ensayo es de certeza para semen humano. Para obtener el protocolo consulte la siguiente bibliograf?a: ?SPERM HY-LITER? Staining Protocol, de la empresa Independent Forensics, disponible en: http://www.ifi-test.com/pdf/shl_protocol.pdf. Este ensayo puede ser acoplado a los actuales procedimientos para el an?lisis de ADN.

Las laminas portaobjetos preparadas con el ensayo Sperm Hy LiterTM pueden ser visualizadas en cualquier microscopio de fluorescencia equipado con la fuente de luz apropiada y filtros de emisi?n DAPI y FITC.

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Adem?s, de los anticuerpos espec?ficos para espermatozoides humanos, el Kit Sperm Hy Liter incorpora un segundo tinte fluorescente (fluoresce?na), que ti?e todos los n?cleos de las c?lulas presentes en la muestra. La Visualizaci?n de los n?cleos fluorescentes no es necesaria para la detecci?n de espermatozoides, pero se recomienda en la b?squeda de semen (ver figura 16).

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Detecci?n de la enzima Fosfatasa ?cida Prost?tica:

La fosfatasa ?cida prot?tica (PA) es una enzima secretada por la pr?stata, que est? presente en grandes cantidades en el l?quido seminal, pero tambi?n se puede encontrar en otros l?quidos biol?gicos, incluyendo la sangre y las secreciones vaginales .

La prueba de la fosfatasa ?cida es una de las m?s conocidas y utilizadas para la identificaci?n del semen, aparte de la tinci?n de c?lulas esperm?ticas, se basa en la presencia en el semen humano de niveles altos de fosfatasa, y/o la inhibici?n de la misma con el ?cido tart?rico. Esta fosfatasa ?cida (EC 3.1.3.2) es de origen prost?tico, y a veces se abrevia "AP".

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En 1935, Kutscher y Wohlbergs informaron que la eyaculaci?n masculina contiene una enzima que hidroliza diferentes esteres de fosfato a un pH ?cido. Su origen se estableci? como de la gl?ndula prost?tica y la enzima que se llam? "fosfatasa de la pr?stata". El origen prost?tico de la enzima fue confirmada por Gomori en 1941 , con el empleo de t?cnicas de tinci?n histoqu?micas. En 1936, Gutman y sus colaboradores encuentran que la actividad de la fosfatasa ?cida es bastante elevada en tejido esquel?tico metastatico y en pacientes que sufren c?ncer de pr?stata.

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En 1945, Lundquist, sugiere que las grandes cantidades de fosfatasa ?cida prost?tica en el semen humano se utilicen como base para la identificaci?n de semen en situaciones m?dico legales. Los estudios sobre esta posibilidad fueron llevados a cabo en Dinamarca por Hansen (1946), Riisfeldt (1946) y Rasmussen (1945). Rasmussen llev? a cabo ensayos cuantitativos de AP en semen, saliva, orina y secreciones vaginales. Los valores m?s bajos observados en material seminal superaron en casi 200 veces los valores m?s altos vistos en los otros materiales.

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Sivaram y Bami, en 1971 lograron diferenciar la fosfatasa ?cida prost?tica de las dem?s fosfatasas, ellos ten?an conocimiento de que Fishman y Lerner en 1953 demostraron que la PA prost?tica es inhibida por el ?cido L (+) tart?rico, el m?todo Sivaram-Bami se basa en dos hechos; la alta actividad de fosfatasa en el semen humano independiente de los espermatozoides y que la fosfatasa ?cida prost?tica es inhibida por el ?cido L- (+) tart?rico.

Muchos compuestos fosfatados tales como -gliserolfosfato, p-nitrofenilfosfato yael fenilfosfato, ?timolftaleinafosfato han sido usados como sustratos en la medici?n de la fosfatasa ?cida. Muchos de ?stos han sido encontrados con falta de sensibilidad o son muy sensibles a la fracci?n no prost?tica. En 1971, Roy y sus colaboradores propusieron un m?todo usando sodio-timolftalein-monofosfato como sustrato. Este m?todo fue modificado m?s tarde por Ewen y Spitzer mostrando un alto grado de selectividad para la fracci?n prost?tica y se convirti? en un excelente m?todo manual para las determinaciones prost?ticas de fosfatasa ?cida, sin embargo, fue limitado en el hecho de que no pudo ser f?cilmente adaptado a la instrumentaci?n automatizada. En 1959, Babson hab?a -naftil-fosfato como sustrato, peroapropuesto un m?todo usando ?encontr? no ser espec?fico para la fracci?n prost?tica. M?s tarde, en 1971, Hillman modofic? el m?todo Babson incluyendo una sal diazotizada [2- amino- 5- clorotolueno] (Rojo R?pido TR), para formar una tintura diazo que pudiera absorber fuertemente a 405 mm. El L-tartrato fue utilizado como un inhibidor espec?fico de la fosfatasa ?cida prost?tica para establecer una manera de diferenciar la isoenzima prost?tica de la no prost?tica .

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Principio del test:

La fosfatasa ?cida hidroliza el &-naftil-fosfato a &-naftol y fosfato inorg?nico. El a-naftol producido es instant?neamente copulado con el Rojo R?pido TR para formar un complejo coloreado (ver figura 17), el cual puede ser medido a 405 mm. El nivel de hidr?lisis es proporcional a la actividad presente de la enzima. El L-tartrato se usa para inhibir la fracci?n prost?tica sin interferir con la secuencia de la reacci?n. Por esa raz?n, el ensayo se realiza con y sin la presencia de L-tartrato, para que la diferencia entre los dos ensayos demuestre el nivel de fosfatasa ?cida prost?tica presente en la muestra.

Detecci?n del Ant?geno Prost?tico (PSA ? P30) y la Semelogenina (SG):
El ant?geno prost?tico (PSA ? P30) es una proteasa producida por la pr?stata, y se puede hallar en el fluido seminal, fluido prost?tico, sangre masculina y orina masculina . Se ha detectado una baja concentraci?n de PSA en la leche materna y algunos tumores de mama. Aunque la PSA se encuentra en estos fluidos, es utilizada como indicador de la presencia de semen en muestras de casos penales.

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La Semenogelina (SG) es una prote?na que proviene de la ves?cula seminal, un sustrato para el ant?geno prost?tico espec?fico (PSA) y un marcador ?til para la identificaci?n de semen. La SG I y SG II son dos de las principales prote?nas secretadas por la ves?cula seminal al semen humano. Ellas interact?an, o no, covalentemente a trav?s de puentes disulfuro de forma instant?nea formando un co?gulo en la eyaculaci?n. El co?gulo es licuado despu?s de unos minutos debido a la acci?n de una proteasa s?rica prost?tica, la PSA, que rompe a la SG en fragmentos. La SG I y la SG II se han encontrado en varios tejidos: las ves?culas seminales, el conducto deferente, la pr?stata, el epid?dimo, el m?sculo esquel?tico, el ri??n, el colon, la tr?quea y en tumores en el pulm?n.

Las muestras maceradas en buffer TB son colocadas en la ventana del dispositivo y van migrando en el papel de filtro interno por capilaridad, en el recorrido, la muestra que contiene el ant?geno se encuentra con los anticuerpos, estos forman un complejo Antigeno-anticuerpo-crom?faro, que quedar? atrapado en el primer frente, donde est? anclado el anticuerpo, desarroll?ndose una banda color rojo.

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En un estudio realizado por Pang & Cheung en el a?o 2006 se evaluaron los tests RSID-Semen (de la empresa ?Independent Forensic?) y ABAcard P30 (de la empresa ?Abacus Diagnostics?). La prueba RSID-Semen utiliza anticuerpos monoclonales anti-humanos de SG, mientras que la prueba ABAcard P30 utiliza anticuerpos monoclonales anti-humanos de PSA.

El fabricante de RSID-semen afirma que puede ser detectado 1 mico litro de fluido seminal humano con su test, mientras que el fabricante del test ABAcard p30 afirma que se pueden detectar hasta 4 ng/ml de PSA con su dispositivo de prueba.

En un ensayo practicado por Ying A., Yang H. Yu, E.F. Diamandis y D.J.A. Sutherland en 199437, ellos reportan que la sensibilidad de la prueba para ABAcard p30 es un poco mejor en este estudio que el anunciado por el fabricante y es comparable a la sensibilidad de otros dos kits comerciales, el PSA Seratec y PSAcheck-Semiquant. La sensibilidad de la prueba de RSID-semen es equivalente a la de otro Kit de detecci?n de SG recientemente comercializado llamado Nanotrap SG. Con ambas pruebas capaces de detectar semen humano y fluido seminal en la norma de 1/50.000, se considera que ofrecen pruebas muy sensibles para la detecci?n de semen.

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Muestras de orina de hombres y mujeres fueron probadas con ambos dispositivos. Todas las muestras de orina masculina y ninguna de las femeninas fueron positivos para la PSA. La detecci?n de PSA en orina de varones se esperaba, porque peque?as cantidades de l?quido de la pr?stata pueden estar presentes en la orina masculina. Ninguna de las muestras fue positiva para el test de la SG.

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Otros fluidos corporales, incluidos sangre, saliva, sudor y muestras de heces de tres hombres y tres mujeres, as? como leche materna, lubricantes y secreciones vaginales, tambi?n se analizaron con los dos dispositivos de prueba, dando resultados negativos y que los mismos no interfieren con el ensayo.

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Publicado por Asecrimf @ 11:18  | Ciencias Criminal?stica
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